Ключевое различие - гель-электрофорез и страница SDS
Гель-электрофорез - это метод разделения макромолекул в электрическом поле. Это распространенный метод в молекулярной биологии для разделения ДНК, РНК и белков из смесей в соответствии с их молекулярными размерами. SDS Page - это тип гель-электрофореза, который используется для отделения белков от белковой смеси в зависимости от их размера. Гель-электрофорез - это термин, используемый для обозначения обычного метода, применяемого для разделения ДНК, РНК и белков, в то время как SDS Page - это один из типов гель-электрофореза. Это ключевое различие между гель-электрофорезом и SDS Page.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое гель-электрофорез
3. Что такое SDS Страница
4. Сравнение бок о бок - гель-электрофорез и SDS Страница
5. Резюме
Что такое гель-электрофорез?
Гель-электрофорез - это распространенный метод, используемый в лабораториях для отделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК, белки и т. Д., От их смесей. Гель используется в гель-электрофорезе. Он действует как молекулярное сито. В гель-электрофорезе используются два типа гелей, а именно агароза и полиакриламид. Выбор геля и препарата геля являются важными факторами, которые следует учитывать при гель-электрофорезе, поскольку размер пор геля следует тщательно регулировать для хорошего разделения молекул с помощью гель-электрофореза. Гель-электрофорез имеет электрическое поле, подключенное к двум концам геля. Один конец геля показывает положительный заряд, а другой - отрицательный.
ДНК и РНК - это отрицательно заряженные молекулы. После того, как они загружаются в гель с отрицательного конца геля и прикладываются к электрическому полю, они мигрируют через поры геля к положительно заряженному концу геля. Скорость миграции зависит от заряда и размера молекулы. Молекулы меньшего размера легче проходят через поры геля, чем молекулы большего размера. Следовательно, молекулы меньшего размера проходят через гель большое расстояние, а молекулы большего размера - небольшое расстояние. Чтобы наблюдать перемещение молекул по гелю, используются специальные типы красителей. Электрическое поле прикладывается в течение определенного периода времени и останавливается, чтобы предотвратить потерю молекул и удерживать молекулы в их перемещенных положениях. В геле можно наблюдать разные полосы. Эти полосы представляют собой молекулы разных размеров. Следовательно,гель-электрофорез полезен для дифференциации молекул по размеру.
Гель-электрофорез включен в различные методы молекулярной биологии в качестве препаративных методов, таких как ПЦР, ПДРФ, клонирование, секвенирование ДНК, Саузерн-блоттинг, картирование генома и т. Д.
Рисунок 01: Электрофорез в агарозном геле
Что такое страница SDS?
Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS Page) - это тип гель-электрофореза, используемый для разделения белков. Когда гель-электрофорез используется для разделения белков, необходимы специальные методы лечения, поскольку белки не заряжены отрицательно, как ДНК и РНК, и не мигрируют в сторону положительного или отрицательного конца. Следовательно, белки денатурируются и покрываются отрицательным зарядом перед гель-электрофорезом. Это делается с использованием моющего средства под названием додецилсульфат натрия (SDS). Гель-электрофорез с использованием SDS и полиакриламидного геля в качестве поддерживающей среды известен как SDS Page. Этот метод обычно используется в биохимии, генетике, судебной медицине и молекулярной биологии.
Во время SDS Page белки смешиваются с SDS. SDS разворачивает белки в линейную форму и покрывает их отрицательным зарядом, пропорциональным их молекулярной массе. Из-за отрицательного заряда молекулы белка мигрируют к концу геля с положительным зарядом и разделяются в соответствии с их молекулярными массами. В SDS Page полиакриламид используется в качестве твердой основы для геля. Фактическое разделение белков в основном зависит от свойств геля. Следовательно, приготовление полиакриламидного геля следует проводить осторожно и использовать правильные концентрации полиакриламида. Гели полиакриламида показывают более высокое разрешение, чем гели агарозы. Следовательно, SDS Page считается методом разделения белков с высоким разрешением.
SDS Page - это тип денатурирующего гель-электрофореза. У него есть серьезное ограничение в анализе белков. Поскольку SDS денатурирует белки перед разделением, он не позволяет обнаруживать ферментативную активность, взаимодействия связывания белков, кофакторы белков и т. Д.
Рисунок 02: Страница SDS
В чем разница между гель-электрофорезом и SDS Page?
Гель-электрофорез против SDS Page |
|
| Гель-электрофорез - это метод разделения макромолекул с помощью электрического поля. | SDS Page - это метод гель-электрофореза высокого разрешения, используемый для разделения белков в зависимости от их массы. |
| Гелевый бег | |
| Он может выполняться как горизонтально, так и вертикально. | Страница SDS всегда работает вертикально. |
| Основание для разделения | |
| Разделение происходит по заряду и размеру. | Разделение белков происходит по массе и заряду. |
| разрешение | |
| Электрофорез в агарозном геле имеет низкое разрешение, а электрофорез в полиакриламидном геле - более высокое разрешение. | SDS Page имеет лучшее разрешение. |
| Денатурация | |
| Гель-электрофорез включает как денатурирующие, так и неденатурирующие методы. | SDS Page денатурирует белки перед разделением. |
Резюме - гель-электрофорез против страницы SDS
Гель-электрофорез - распространенный метод, используемый для разделения и анализа ДНК, РНК и белков в зависимости от их размера и заряда. Существует два основных типа гель-электрофореза, а именно электрофорез в агарозном геле и электрофорез в полиакриламидном геле. Гели агарозы используются в основном для разделения нуклеиновых кислот; когда требуется более высокое разрешение, используются полиакриламидные гели. SDS Page - это тип гель-электрофореза, обычно используемый для разделения сложных смесей белков. Он считается методом разделения белков с высоким разрешением. В этом разница между гель-электрофорезом и SDS Page.
