Электрофорез против электроосмоса
Методы физического разделения, такие как фильтрация, дистилляция, колоночная хроматография, - непростые методы, когда дело доходит до разделения некоторых молекул. Электрофорез и электроосмос - два других метода разделения, которые можно использовать для разделения заряженных частиц.
Что такое электрофорез?
Электрофорез - это метод разделения молекул в зависимости от их размеров. В основе этого разделения лежит заряд молекулы и их способность двигаться в электрическом поле. Это наиболее распространенный и основной метод в молекулярной биологии для разделения молекул, особенно ДНК и белков. Это в основном используется, потому что это относительно просто и недорого. Аппарат для электрофореза может быть немного сложнее, и его подготовка требует времени. Но мы легко можем сделать прибор для электрофореза из того, что есть в лаборатории. Методы электрофореза могут варьироваться в зависимости от наших целей. Мы можем использовать одномерный электрофорез для разделения ДНК или белка. Двумерный электрофорез используется, когда требуются более разрешенные образцы (как в случае отпечатков пальцев). Гель используется в качестве поддерживающей среды для разделения молекул. Этот гель можно приготовить в виде плоских листов или тюбиков. В основе этой процедуры лежит разделение молекул в зависимости от скорости их движения через гель при приложении электрического поля. Отрицательно заряженные молекулы, такие как ДНК, имеют тенденцию перемещаться в этом электрическом поле к положительному полюсу, в то время как положительно заряженные молекулы стремятся перемещаться к отрицательному полюсу. В электрофорезе используются два типа гелей: агароза и полиакриламид. У этих двоих разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разного размера. Электростатические заряды в геле действуют как сила. В основе этой процедуры лежит разделение молекул в зависимости от скорости их движения через гель при приложении электрического поля. Отрицательно заряженные молекулы, такие как ДНК, имеют тенденцию перемещаться в этом электрическом поле к положительному полюсу, в то время как положительно заряженные молекулы стремятся перемещаться к отрицательному полюсу. В электрофорезе используются два типа гелей: агароза и полиакриламид. У этих двоих разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разного размера. Электростатические заряды в геле действуют как сила. В основе этой процедуры лежит разделение молекул в зависимости от скорости их движения через гель при приложении электрического поля. Отрицательно заряженные молекулы, такие как ДНК, имеют тенденцию перемещаться в этом электрическом поле к положительному полюсу, в то время как положительно заряженные молекулы стремятся перемещаться к отрицательному полюсу. В электрофорезе используются два типа гелей: агароза и полиакриламид. У этих двоих разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разного размера. Электростатические заряды в геле действуют как сила. У этих двоих разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разного размера. Электростатические заряды в геле действуют как сила. У этих двоих разные разрешающие способности. Гель действует как сито для фильтрации молекул разного размера. Электростатические заряды в геле действуют как сила.
Разделение зависит от подвижности ионов.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = сила, действующая на частицу
f = коэффициент трения
V = средняя скорость миграции
Z = заряд движущейся частицы
e = элементарный заряд
E = напряженность электрического поля
Необходимые условия для электрофореза относительно просты. При приготовлении геля и прогоне образца используется буфер. Маркеры и красители используются для визуализации.
Что такое электроосмос?
Это процесс перемещения жидкости через материал с помощью приложенного электрического поля. Движение может происходить через пористый материал, вдоль капилляра, мембраны и т. Д. Это можно использовать в качестве метода разделения (особенно капиллярного электроосмоса). Скорость жидкости линейно пропорциональна приложенному электрическому полю. Это также зависит от материала, из которого изготовлен канал, и используемого раствора. На границе раздела раствор и материал получили противоположные заряды, и это известно как двойной электрический слой. Когда к раствору прикладывается электрическое поле, двойной электрический слой перемещается под действием возникающей кулоновской силы. Это называется электроосмотическим потоком.
В чем разница между электрофорезом и электроосмосом? • При электрофорезе твердые частицы (макромолекулы, такие как нуклеиновые кислоты или белки) перемещаются с помощью электрического поля. Но при электроосмосе жидкость движется. • При электрофорезе твердый материал носителя представляет собой гель. Но это электроосмос, это может быть гель, мембрана, капилляр и т. Д. |