Ключевое различие - нитроцеллюлоза и нейлоновая мембрана
Блоттинг - важный метод обнаружения конкретных последовательностей ДНК, РНК и белков из их смесей в молекулярной биологии. Это делается с помощью мембраны, которая называется блот. Существуют различные методы блоттинга, такие как северный, южный и вестерн-блоттинг. Выбор подходящей мембраны для процесса блоттинга должен быть сделан осторожно, чтобы предотвратить неспецифическое связывание и неправильное обнаружение. Нитроцеллюлоза, нейлон и ПВДФ обычно используются в качестве мембран в методах блоттинга. У них разные характеристики. Ключевое различие между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной заключается в том, что нитроцеллюлозные мембраны обладают высоким потенциалом иммобилизации белка, тогда как нейлоновые мембраны имеют высокий потенциал иммобилизации нуклеиновых кислот. Однако оба типа мембран часто используются в методах блоттинга.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое нитроцеллюлозная мембрана
3. Что такое нейлоновая мембрана
4. Сравнение бок о бок - нитроцеллюлоза и нейлоновая мембрана
5. Резюме
Что такое нитроцеллюлозная мембрана?
Нитроцеллюлозная мембрана - это обычно используемый мембранный фильтр в методах блоттинга нуклеиновых кислот и белков. Обладает высоким потенциалом связывания с белками. Следовательно, нитроцеллюлозные мембраны широко используются в технике вестерн-блоттинга. Мембраны из нитроцеллюлозы совместимы со всеми методами гибридизации и демонстрируют превосходную связывающую способность без помех. Мембраны из нитроцеллюлозы по своей природе гидрофильны. Они осуществляют гидрофильное взаимодействие с молекулами и эффективно иммобилизуют их на мембране. Коммерческие нитроцеллюлозные мембраны доступны с двумя размерами пор: 0,45 и 0,2 мкм.
Рисунок 01: Нитроцеллюлозная мембрана, используемая при вестерн-блоттинге.
Что такое нейлоновая мембрана?
Нейлоновая мембрана - это еще один тип коммерческой мембраны, используемой в технике блоттинга. Альтернативно он используется с нитроцеллюлозными мембранами для саузерн-блоттинга. Нейлоновые мембраны идеальны для саузерн-блоттинга, чем нитроцеллюлоза, из-за их высокого сродства к связыванию с ДНК. Из-за нескольких уникальных особенностей нейлоновых мембран, исследователи обычно используют нейлоновые мембраны для южного и северного блоттинга вместо нитроцеллюлозной мембраны. В отличие от нитроцеллюлозы, нейлоновые мембраны также рекомендуются для снятия изоляции и повторного зондирования.
Рисунок 02: Нейлоновая мембрана, используемая для саузерн-блоттинга.
В чем разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной?
Различать статью в середине перед таблицей
Нитроцеллюлоза против нейлоновой мембраны |
|
| Мембраны из нитроцеллюлозы хрупкие. | Нейлоновые мембраны менее хрупкие. |
| Обработка | |
| С ними сложно справиться. | С ними легко обращаться. |
| Репробирование | |
| Нитроцеллюлозные мембраны без подложки сложно повторно зондировать. | Повторное зондирование легко с помощью нейлоновых мембран. |
| Совместимость с различными условиями хранения | |
| Мембраны из нитроцеллюлозы обладают меньшей прочностью, чтобы выдерживать различные условия хранения. | Нейлоновые мембраны более устойчиво реагируют на различные условия хранения. |
| Использовать | |
| Предварительное увлажнение не требуется. | Для нейлоновых мембран предварительное смачивание не требуется. |
| Гидрофильная природа | |
| Нитроцеллюлозные мембраны гидрофильны по своей природе, но менее гидрофильны, чем нейлоновые мембраны. | Они очень гидрофильны по своей природе. |
| Иммобилизационный потенциал | |
| Мембраны из нитроцеллюлозы имеют меньшее сродство к нуклеиновым кислотам. Но он имеет высокое сродство к белкам. | Нейлоновые мембраны обладают более высоким потенциалом связывания с нуклеиновыми кислотами, чем нитроцеллюлозные мембраны. |
Резюме - Нитроцеллюлоза против нейлоновой мембраны
Нитроцеллюлозные и нейлоновые мембраны - это специальные листы, используемые в технике блоттинга для воспроизведения рисунка полос на геле. Они обеспечивают возможность обнаружения конкретной последовательности или белка из смесей путем иммобилизации их на мембране. Как только молекулы иммобилизованы на мембране, ее можно использовать в качестве субстрата для гибридизационного анализа с мечеными зондами. Мембрана из нитроцеллюлозы обычно используется для обнаружения белков в методике вестерн-блоттинга из-за ее высокой аффинности связывания с белками. Нейлоновые мембраны часто используются для южного и северного блоттинга. В этом разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной.
