Ключевое различие - трансформанты против рекомбинантов
Рекомбинация и трансформация - два важнейших шага в генной инженерии, когда характеристики организма намеренно изменяются путем манипулирования его генетическим материалом. Рекомбинация - это процесс, при котором чужеродная ДНК включается в векторный геном и образуется рекомбинантная молекула ДНК. Трансформация - это следующий шаг, на котором рекомбинантная молекула вводится в организм-хозяин. Клетка-хозяин или организм способствует экспрессии рекомбинантной молекулы. Ключевое различие между трансформантами и рекомбинантами состоит в том, что трансформанты - это клетки или организмы, которые принимают рекомбинантную молекулу внутрь и способствуют экспрессии, тогда как рекомбинанты - это векторы, которые позволяют вставлять чужеродную ДНК в свой геном и транспортировать в трансформанты хозяина для экспрессии.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое трансформанты
3. Что такое рекомбинанты
4. Сравнение бок о бок - трансформанты и рекомбинанты
5. Резюме
Что такое трансформанты?
Трансформанты - это клетки или организмы, в которых рекомбинантная ДНК используется для экспрессии. Бактерии обычно используются в качестве организмов-хозяев в генной инженерии, поскольку их легко выращивать, размножать и обрабатывать в лабораторных условиях, а процесс трансформации проще по сравнению с другими организмами. Самая популярная бактерия-хозяин, используемая в генной инженерии, - это бактерия E. coli.
В процессе трансформации клетки-хозяева заставляют принимать рекомбинанты. Однако некоторые клетки-хозяева не поглощают рекомбинантные молекулы. Они известны как нетрансформанты, а клетки, содержащие внутри рекомбинантные молекулы ДНК, известны как трансформанты. Отбор трансформантов из нетрансформантов осуществляется с использованием селектируемых маркеров в молекулярной биологии. Селективные маркеры вставляются в векторный геном вместе со вставкой ДНК. Обычно используемые селектируемые маркеры представляют собой гены устойчивости к антибиотикам. Гены-маркеры облегчают дифференциацию трансформантов и продолжают процесс. После процесса трансформации бактерии выращивают в среде, содержащей антибиотики. Только трансформанты способны расти на этой среде, поскольку они содержат рекомбинанты внутри.
После того, как молекула рекомбинантной ДНК трансформируется внутри организма-хозяина, чужеродная ДНК может либо интегрироваться в геном клетки-хозяина, либо оставаться неинтегрированной в цитоплазме. Однако экспрессия и репликация чужеродной ДНК происходят в организме хозяина и приводят к желаемому результату процесса.
Что такое рекомбинанты?
Рекомбинант - это организм или клетка, которые обладают рекомбинированным геномом, содержащим чужеродную ДНК. Рекомбинанты - это результат процесса генной инженерии. Они созданы искусственно in vitro путем вставки интересующих генов и модификации генома. Часто бактериальные плазмиды и бактериофаги действуют как рекомбинанты в генной инженерии. В нем есть химеры из разных ДНК. Молекула рекомбинантной ДНК переносит чужеродную ДНК в организм-хозяин и заставляет его экспрессироваться и формировать желаемый продукт.
Рекомбинантные молекулы конструируются с использованием эндонуклеаз рестрикции и ДНК-лигаз. Требуемый фрагмент ДНК отделяется от исходного организма и вставляется в вектор, чтобы сделать рекомбинант для трансформации. Вырезание интересующего гена и открытие векторного организма следует проводить с использованием одного и того же рестрикционного фермента, чтобы создать совместимые липкие концы, чтобы соединить их вместе. Когда чужеродная ДНК включается в векторный геном, она называется рекомбинантной или рекомбинантной молекулой ДНК.
Рисунок 02: Рекомбинантная ДНК
В чем разница между трансформантами и рекомбинантами?
Различать статью в середине перед таблицей
Трансформанты против рекомбинантов |
|
| Трансформанты - это клетки, внутри которых находится рекомбинантная молекула ДНК. | Рекомбинанты - это молекулы-носители, в собственный геном которых вставлена чужеродная ДНК. |
| Экспрессия чужеродной ДНК | |
| Они являются клетками-хозяевами, которые способны экспрессировать рекомбинантную ДНК. | Они должны иметь возможность самовоспроизводиться в организме хозяина. |
| Выбор | |
| Клетки, которые можно легко выращивать и размножать, выбирают в качестве клеток-хозяев. | Они должны легко извлекаться и содержать выбираемые маркеры. |
Резюме - трансформанты против рекомбинантов
Трансформанты - это клетки или организмы, внутри которых находятся рекомбинантные молекулы ДНК. Рекомбинанты - это организмы или клетки, подвергшиеся генетической рекомбинации и имеющие чужеродную ДНК в своих геномах. Бактериальные клетки часто используются в качестве клеток-хозяев для трансформации, а плазмиды и бактериофаги часто используются в качестве векторов в технологии рекомбинантных ДНК. В этом разница между трансформантами и рекомбинантами.
