Ключевое различие - гибридизация in situ против иммуногистохимии
Диагностика рака и инфекционных заболеваний - популярное направление, в котором используются новые методы, основанные на протеомике и геномике, с целью выявления опухолей или инфекционных клеток, их пролиферации и мест развития клеток, а также анализа генетической основы большинства инфекционных и неинфекционных заболеваний. Это приведет к точной обработке и разработке лекарств, а также к разработке индивидуальных методов лечения заболеваний. Гибридизация in situ (ISH) и иммуногистохимия (IHC) - два таких широко используемых метода в биологии рака, и ключевое различие между гибридизацией in situ и иммунохимией заключается в молекулах, которые используются в процедуре анализа. В ISH зонды нуклеиновых кислот используются в анализе, тогда как в IHC моноклональные и поликлональные антитела используются для диагностических определений.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое гибридизация in situ
3. Что такое иммуногистохимия
4. Сходства между гибридизацией in situ и иммуногистохимией
5. Сравнение бок о бок - гибридизация in situ и иммуногистохимия в табличной форме
6. Резюме
Что такое гибридизация in situ (ISH)?
Гибридизация in situ - это метод гибридизации нуклеиновых кислот, который выполняется непосредственно на части или участке ткани, во всей ткани или в клетках. Методика зависит от теории комплементарного спаривания оснований Уотсона Крика, в результате чего получаются гибриды ДНК-ДНК или гибриды ДНК-РНК, которые могут обнаруживать мутировавшие гены или идентифицировать требуемый интересующий ген. Одноцепочечные последовательности ДНК, двухцепочечные последовательности ДНК, одноцепочечные последовательности РНК или синтетические олигонуклеотидные последовательности используются в качестве зондов во время методики гибридизации, и эти зонды метят радиоактивным фосфором на его 5'-конце для процедур идентификации при авторадиографии или метят с использованием флуоресцентных красителей.. Существуют различные типы доступных методов ISH в зависимости от типа используемого датчика и типа применяемой техники визуализации.
Рисунок 01: Флуоресцентная гибридизация in situ
ISH имеет множество применений, в основном в молекулярной диагностике инфекционных заболеваний, чтобы идентифицировать наличие патогенов и подтвердить патоген с помощью молекулярной диагностики. Он также используется в областях биологии развития, кариотипирования, филогенетического анализа и физического картирования хромосом.
Что такое иммуногистохимия (ИГХ)?
В методике ИГХ основной анализируемой молекулой является антиген. Во время ИГХ используются моноклональные и поликлональные антитела для определения наличия антигенов при инфекции или статусе пролиферации злокачественных клеток. Метод основан на связывании антиген-антитело, и в этом методе используются ферментные метки; одним из таких приложений является ELISA (иммуноферментный анализ). Маркеры также могут быть флуоресцентно меченными антителами или радиоактивными антителами.
Рисунок 02: Иммуногистохимия
ИГХ широко используется для обнаружения раковых клеток. Диагностические процедуры нацелены на антигены, присутствующие в опухолевых клетках, для идентификации и характеристики опухоли. Та же процедура используется для диагностики инфекционных агентов. Моноклональные и поликлональные антитела также используются для анализа различных генных продуктов путем включения реакции связывания антитело-антиген между желаемым белком и вводимым синтетическим антителом.
Каковы сходства между гибридизацией in situ и иммуногистохимией?
- ISH и IHC - высокоспецифичные реакции.
- Оба метода очень точны.
- Оба метода можно использовать в диагностике онкологических и инфекционных заболеваний.
- Эти методы выполняются в стерильных условиях in vitro.
- Оба являются быстрыми методами, обеспечивающими воспроизводимые результаты.
- ISH и IHC используют методы обнаружения, такие как радиоактивное мечение и флуоресцентные методы.
В чем разница между гибридизацией in situ и иммуногистохимией?
Различать статью в середине перед таблицей
Гибридизация in situ против иммуногистохимии |
|
| ISH - это метод гибридизации нуклеиновых кислот, который выполняется непосредственно на части или срезе ткани или на всей ткани. | ИГХ - это метод, при котором моноклональные и поликлональные антитела используются для определения наличия антигенов, которые представляют собой специальные белковые маркеры, размещенные на поверхности клеток. |
| Тип анализируемых биомолекул | |
| ISH анализирует нуклеиновые кислоты. | ИГХ анализирует белки-антигены. |
| Основа биохимической реакции | |
| В этом методе происходит комплементарное спаривание оснований между ДНК-ДНК или ДНК-РНК. | Взаимодействия антиген-антитело участвуют в иммуногистохимии. |
| Ферментно-связанные методы обнаружения | |
| При ISH нельзя использовать методы определения, связанные с ферментом. | В IHC можно использовать методы обнаружения, связанные с ферментом. |
Резюме - Гибридизация in situ против иммуногистохимии
Молекулярная диагностика - это быстрые и подтверждающие методы, которые можно использовать для выявления неинфекционного заболевания, такого как рак, или инфекционного заболевания, такого как ВИЧ или туберкулез, на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках, которые приводят к проявлению заболевания. Молекулярные маркеры могут присутствовать в форме экспрессируемых белков или на генетическом уровне, на основе чего вводятся различные новые методы для повышения эффективности и они менее трудоемки, хотя эти методы связаны с высокой стоимостью. Таким образом, ISH зависит от образования гибридов ДНК-ДНК или ДНК-РНК, а IHC зависит от конкретных реакций между антителом и антигеном. В этом разница между гибридизацией in situ.
Скачать PDF-версию исследования «Гибридизация in situ против иммуногистохимии»
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономных целях в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, скачайте PDF-версию здесь Разница между гибридизацией in situ и иммуногистохимией.
