Ключевое различие - иммуноцитохимия против иммуногистохимии
Иммуноцитохимия (ICC) и иммуногистохимия (IHC) - два широко используемых метода молекулярной диагностики, которые идентифицируют и подтверждают наличие как неинфекционных заболеваний, так и инфекционных заболеваний на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках. Ключевым отличием иммуноцитохимии и иммуногистохимии является молекула, которая используется в качестве процедуры анализа в этих методах. В ICC используются первичные и вторичные антитела, конъюгированные с такими маркерами, как флуоресценция, тогда как IHC, моноклональные и поликлональные антитела используются для диагностических определений.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое иммуноцитохимия
3. Что такое иммуногистохимия
4. Сходства между иммуноцитохимией и иммуногистохимией
5. Параллельное сравнение - иммуноцитохимия и иммуногистохимия в табличной форме
6. Резюме
Что такое иммуноцитохимия (ICC)?
ICC использует первичные и вторичные антитела, связанные с маркерами, такими как флуоресцентные маркеры или ферменты, и является мощным методом обнаружения антигенов, присутствующих в клетках-мишенях, которые могут быть либо инфекционными клеточными частицами, либо клетками раковых опухолей. Для иммуноцитохимии требуются три типа контроля.
- Первичное антитело - контроль, который показывает специфичность связывания первичного антитела с антигеном.
- Вторичное антитело - контроль, который показывает, что метка специфична для первичного антитела.
- Label Controls - показать, что маркировка является результатом добавленной метки, а не результатом эндогенной маркировки.
Рисунок 01: Иммуноцитохимия маркирует отдельные белки внутри клеток (здесь тирозингидроксилаза в аксонах симпатических вегетативных нейронов показана зеленым).
Первичный контроль антител специфичен для каждого нового антитела и не может быть повторен для каждого эксперимента. Вторичный контроль антител разработан на основе первичных антител, используемых в эксперименте, и включен в каждый эксперимент. Элемент управления маркировкой включается, если изменяется условие процедуры, изменяется образец или когда обнаруживается неожиданная маркировка.
Двумя основными приложениями ICC являются радиоиммуно-анализ (RIA) и иммуноферментный анализ (ELISA). Наиболее часто используемым антителом является иммуноглобулин G.
Что такое иммуногистохимия (ИГХ)?
В иммуногистохимии исходный образец содержит моноклональные и поликлональные антитела для определения присутствия антигенов в чужеродных клетках. Этот метод основан на специфической реакции связывания антиген-антитело. Антитела, используемые при обнаружении, могут быть помечены разными маркерами; они могут быть маркерами флуоресценции, маркерами с радиоактивной меткой или химическими маркерами. Посредством облегчения связывания in vitro между антигеном и целевым антителом можно определить присутствие или отсутствие конкретного белка клетки.
Фигура 02: Иммуногистохимическое окрашивание нормальной почки на CD10
В настоящее время ученые участвуют в разработке антител-мишеней к специфическим антигенам, присутствующим в клетках, которые могут развиваться как клетки злокачественной опухоли или как антигены, присутствующие в инфекционных агентах, таких как ВИЧ.
В чем сходство иммуноцитохимии и иммуногистохимии?
- Реакции очень специфичны и точны в ICC и IHC.
- Приложения ICC и IHC включают диагностику рака и инфекционных заболеваний.
- Стерильные условия должны поддерживаться в обоих условиях, и они должны выполняться in vitro.
- Оба метода обеспечивают воспроизводимые результаты.
- Оба быстрые.
- Методы радиоизлучения и флуоресценции используются в качестве методов обнаружения как в ICC, так и в IHC.
- Оба основаны на спаривании антиген-антитело.
В чем разница между иммуноцитохимией и иммуногистохимией?
Различать статью в середине перед таблицей
Иммуноцитохимия (ICC) против иммуногистохимии (IHC) |
|
ICC использует маркеры, связанные с первичными и вторичными антителами, такие как флуоресцентные маркеры или ферменты, и является мощным методом обнаружения антигенов, присутствующих на клетках-мишенях. | ИГХ - это метод, в котором используются моноклональные и поликлональные антитела для определения наличия антигенов, которые представляют собой специальные белковые маркеры, размещенные на поверхности клеток. |
Источник образца | |
Образцы, полученные из тканей, которые были гистологически обработаны на тонкие срезы, используются в ICC. | IHC использует образцы, состоящие из клеток, выращенных в монослое, или клеток в суспензии, которые наносятся на предметное стекло. |
Обработка образцов | |
В ICC клетки должны быть проницаемыми для облегчения проникновения антител к внутриклеточным мишеням. | При ИГХ клетки перед окрашиванием фиксируют формалином и заливают парафином. |
Резюме - Иммуноцитохимия против иммуногистохимии
Молекулярная диагностика используется для выявления и подтверждения наличия как неинфекционных заболеваний, так и инфекционных заболеваний на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках. Молекулярные маркеры могут быть белками или последовательностями ДНК или РНК; Развитие таких технологий, как ICC и IHC, дало ученым возможность идентифицировать болезнь и ее причину на ранней стадии. И ICC, и IHC зависят от специфических реакций между антителом и антигеном, несмотря на источник образца. Основное различие между иммуноцитохимией и иммуногистохимией заключается в обработке образцов двумя процедурами.
Скачать версию PDF «Иммуноцитохимия против иммуногистохимии»
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономных целях в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, скачайте PDF-версию здесь. Разница между иммуноцитохимией и иммуногистохимией.