Разница между иммунофлуоресценцией и иммуногистохимией

2024 Автор: Mildred Bawerman | [email protected]. Последнее изменение: 2023-12-16 08:42

Ключевое различие - иммунофлуоресценция против иммуногистохимии

Диагностика заболеваний с использованием молекулярно-биологических методов стала новой областью клинической лабораторной технологии. Он включает в себя все тесты и методы для выявления заболевания и выяснения причины заболевания путем анализа ДНК, РНК или экспрессируемых белков в организме. Быстрый прогресс в области молекулярной диагностики позволил провести фундаментальные исследования инфекционных и неинфекционных заболеваний. Они используются для определения изменений в последовательности или уровнях экспрессии важнейших генов или белков, вовлеченных в заболевание. Иммунофлуоресценция (IF) и иммуногистохимия (IHC) - два таких широко используемых метода в биологии рака. IF - это тип IHC, в котором метод обнаружения флуоресценции используется для анализа моноклональных и поликлональных антител, тогда как IHC использует химические методы для обнаружения моноклональных и поликлональных антител. Это ключевое различие между IF и IHC.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и основные различия

2. Что такое иммунофлуоресценция

3. Что такое иммуногистохимия

4. Сходства между иммунофлуоресценцией и иммуногистохимией

5. Параллельное сравнение - иммунофлуоресценция и иммуногистохимия в табличной форме

6. Резюме

Что такое иммунофлуоресценция (ИФ)?

Иммунофлуоресценция - это метод обнаружения, при котором антитела, используемые в анализе, метятся с использованием флуоресцентных красителей или флуоресцентных белков для целей обнаружения. Меченые вторичные антитела могут вызывать нежелательные фоновые сигналы; поэтому метод IF основан на маркировке самого первичного антитела в настоящее время, чтобы избежать нежелательных сигналов во время обнаружения. С помощью этого метода предотвращается неспецифическое связывание между первичным и вторичным антителом, и оно происходит быстрее, так как не требуется вторичный этап инкубации. Качество данных также улучшено.

Рисунок 01: Двойное иммунофлуоресцентное окрашивание на BrdU, NeuN и GFAP

Флуорохромы или флуоресцентные красители - это соединения, которые могут поглощать излучение, предпочтительно возбужденное ультрафиолетовое излучение. Когда частицы достигают основного состояния из возбужденного состояния, они испускают излучение, которое улавливается и детектируется детектором для формирования спектра. Очень важно, чтобы флуоресцентная метка была совместимой и стабильной для конкретной реакции, и чтобы она была правильно конъюгирована с антителом, чтобы получить точные результаты. Одним из наиболее часто используемых флуорохромов является изотиоцианат флуоресцеина (FITC) зеленого цвета с длинами волн пиков поглощения и излучения 490 нм и 520 нм соответственно. Родамин, другой агент, используемый в IF, имеет красный цвет и имеет четко выраженные длины волн пиков поглощения и излучения 553 нм и 627 нм.

Что такое иммуногистохимия (ИГХ)?

ИГХ - это метод молекулярного тестирования, применяемый для идентификации и подтверждения присутствия антигена в клетке-мишени. Клеткой-мишенью может быть инфекционная частица, микробный патоген или клетка злокачественной опухоли. IHC использует моноклональные и поликлональные антитела для определения наличия антигенов, присутствующих на поверхности клеток-мишеней. Методика основана на связывании антиген-антитело. Маркер обнаружения конъюгируют с этими антителами для обнаружения наличия или отсутствия конкретного антигена. Эти маркеры могут быть химическими маркерами, такими как ферменты, флуоресцентно меченые антитела или радиоактивно меченные антитела.

Фигура 02: Срез мозга мыши, окрашенный иммуногистохимическим методом.

Наиболее популярным применением ИГХ является биология раковых клеток для определения наличия злокачественных опухолей, но он также используется для обнаружения инфекционных заболеваний.

Каковы сходства между иммунофлуоресценцией и иммуногистохимией?

• Иммунофлуоресценция и иммуногистохимия происходят в условиях in vitro.
• Оба метода основаны на антиген-антителе.
• Оба метода очень быстрые.
• Результаты методов воспроизводимы.
• Оба улучшили качество данных.
• Эти методы используются в диагностике онкологических и инфекционных заболеваний.

В чем разница между иммунофлуоресценцией и иммуногистохимией?

Различать статью в середине перед таблицей

Иммунофлуоресценция против иммуногистохимии
IF - это метод обнаружения, при котором антитела, используемые в анализе, маркируются с использованием флуоресцентных красителей или флуоресцентных белков для обнаружения.	IHC - это метод обнаружения, при котором антитела, используемые в анализе, маркируются с использованием химикатов или радиоактивных элементов для обнаружения.
Точность
Точность выше в методе IF по сравнению с IHC.	Точность ниже в IHC.
Специфика
IF более конкретен.	IHC менее конкретен.

Резюме - Иммунофлуоресценция против иммуногистохимии

Молекулярные механизмы привели к множеству изменений в области медицины, что привело к появлению передовых методов молекулярного тестирования, которые привели к революциям в области диагностики. Эти изобретения привели к быстрой и точной идентификации и подтверждению болезни, что позволило успешно вводить и производить лекарства. Эти методы также используются в фармакологии для поиска мишеней лекарств и подтверждения фармакокинетических свойств лекарства во время метаболизма лекарства. IF и IHC - это два диагностических метода, которые основаны на концепции связывания антигена и антитела, хотя способы обнаружения в обоих методах различаются. IF использует принцип флуоресценции для обнаружения антигена, а IHC использует концепцию химической конъюгации для обнаружения антигена. В этом разница между IF и IHC.

Скачать PDF-версию иммунофлуоресценции против иммуногистохимии

Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономных целях в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, скачайте PDF-версию здесь. Разница между иммунофлуоресценцией и иммуногистохимией.