Ключевое различие - ДНК против экстракции РНК
Изучение ДНК и РНК - важные аспекты для понимания основных концепций молекулярной биологии, биотехнологии и генетики. Извлечение чистых образцов ДНК и РНК необходимо для проведения экспериментальных процедур во время этих исследований. Ключевое различие между экстракцией ДНК и РНК заключается в том, что процесс экстракции ДНК очищает ДНК, а экстракция РНК очищает РНК. Процесс экстракции ДНК состоит из трех этапов: лизис клеток и катаболизм мембранных липидов и белков, слипание катаболитов концентрированным солевым раствором и осаждение ДНК этанолом. Трехэтапная процедура может состоять из двух необязательных шагов. Процесс очистки РНК состоит из четырех различных этапов: добавление тиоцианата гуанидия для лизиса клеток, денатурация белков, включая рибонуклеазы,разделение РНК добавлением хлороформа и фенола и промывка осадка этанолом.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое экстракция ДНК
3. Что такое экстракция РНК
4. Сходства между экстракцией ДНК и РНК
5. Сравнение бок о бок - ДНК и экстракция РНК в табличной форме
6. Резюме
Что такое извлечение ДНК?
Извлечение ДНК - это физический и химический процесс, который используется для очистки ДНК из образца. Извлечение ДНК - важный аспект в контексте молекулярной биологии и судебной медицины. Процесс состоит из трех основных этапов. Вначале должны быть получены интересующие клетки. Затем облегчается лизис клеток, чтобы разрушить клеточную мембрану, которая открывает клетку и обнажает цитоплазму вместе с ДНК. Поверхностно-активные вещества или другие детергенты могут быть использованы для лизиса липидов с клеточной мембраны, в то время как присутствующие белки катаболизируются протеазами. Это необязательный шаг. Как только клетка лизируется, слипание катаболизированных молекул облегчается концентрированными солевыми растворами. Затем следует центрифугирование раствора, которое отделяет комки мусора от ДНК. На этом этапедифференцированная ДНК смешивается с реагентами и солями, используемыми во время клеточного цикла.
Рисунок 01: Извлечение ДНК
Чтобы очистить его дальше, можно использовать следующие шаги. Одним из методов является осаждение этанолом, которое включает смешивание ледяного этанола с отделенным образцом ДНК. ДНК нерастворима в спирте и, таким образом, образует осадок из-за агрегации молекул ДНК вместе. Ацетат натрия добавляется в этом процессе, чтобы увеличить степень осаждения за счет увеличения ионной силы. В дополнение к процессу осаждения этанолом для этого также может быть инициирован процесс экстракции фенол-хлороформ. В этом методе фенол денатурирует белки, присутствующие в образце. После центрифугирования денатурированные белки останутся в органической фазе, в то время как молекулы ДНК, смешанные с хлороформом, будут присутствовать в водной фазе. Хлороформ удалит остатки фенола. После завершения добычиДНК сохраняется растворенной в буфере ТЕ или сверхчистой воде.
Что такое извлечение РНК?
Очистка РНК - это процесс, при котором РНК очищается из биологического образца. Из-за наличия в клетках и тканях рибонуклеазы этот процесс усложняется. Фермент рибонуклеаза обладает способностью быстро разрушать РНК. Химическая природа рибонуклеаз чрезвычайно стабильна, и их трудно инактивировать. Возможен вариант нейтрализации рибонуклеаз. Поскольку этот фермент присутствует в клетках и тканях повсеместно, для выделения РНК разработаны специальные методы. Из многих методов наиболее распространенным методом является экстракция тиоцината гуанидиния, фенола и хлороформа.
Рисунок 02: Извлечение РНК
Метод экстракции тиоцинат гуанидиния-фенол-хлороформ зависит от центрифугирования и разделения фаз. Центрифугируемая смесь состоит из водного образца и водонасыщенного раствора, состоящего из фенола и хлороформа. После центрифугирования раствор состоит из верхней водной фазы и нижней органической фазы в условиях нейтрального pH (pH 7-8). РНК присутствует в водной фазе. Органическая фаза обычно состоит из белков, растворенных в феноле, и липидов, растворенных в хлороформе. Добавляется хаотропный агент (молекула, способная разрывать водородные связи между молекулами воды); это известно как тиоцианат гуанидиния. Этот агент обладает способностью денатурировать белки, в том числе рибонуклеазы, которые могут разрушать РНК, и участвует в лизисе клеток. Он также отделяет рРНК от рибосомных белков. Заключительный этап очистки РНК - промывание выпавшего осадка водной фазы этанолом. РНК также можно очистить с использованием жидкого азота.
В чем сходство между экстракцией ДНК и РНК?
- Оба процесса экстракции используют вредные химические вещества, такие как фенол и хлороформ.
- Центрифугирование - важный метод для обоих процессов.
- Этанол используется для промывки осадка и получения очищенной ДНК или РНК.
В чем разница между экстракцией ДНК и РНК?
Различать статью в середине перед таблицей
ДНК против экстракции РНК |
|
| Извлечение ДНК - это процесс извлечения ДНК из организма или образца. | Экстракция РНК - это процесс извлечения РНК из образца. |
| Шаги | |
| Процесс выделения ДНК состоит из трех различных этапов с двумя дополнительными этапами. | Процесс извлечения РНК состоит из четырех этапов. |
| Реагенты | |
| Поверхностно-активные вещества, протеазы (необязательно), спирт, хлороформ, фенол, ацетат натрия используются для экстракции ДНК. | Для экстракции РНК используются тиоцианат гуанидия, хлороформ, фенол, этанол. |
Резюме - ДНК против экстракции РНК
Выделение ДНК и РНК - важные аспекты экспериментальных процедур для изучения молекулярной биологии, генетики и биотехнологии. В обоих процессах используются аналогичные реагенты, но при экстракции РНК используется специальный реагент, известный как тиоцианат гуанидия, который снижает активность рибонуклеаз. Это основное различие между экстракцией ДНК и РНК.
Скачать PDF-версию исследования ДНК и экстракции РНК
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономных целях в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, скачайте PDF-версию здесь. Разница между экстракцией ДНК и РНК.
