Разница между Phusion и Taq-полимеразой

2024 Автор: Mildred Bawerman | [email protected]. Последнее изменение: 2023-12-16 08:42

Ключевое различие - Phusion vs Taq-полимераза

ДНК-полимеразы - широко используемые ферменты в методах молекулярной биологии, а также естественным образом присутствуют во всех организмах, подвергающихся репликации ДНК. Они являются ключевыми ферментами полимеризации, которые участвуют во время репликации. ДНК-полимераза способна добавлять нуклеотиды к свободному 3'-концу цепи ДНК, тем самым вызывая удлинение новой цепи. В настоящее время в связи с развитием молекулярной биологии в диагностике заболеваний и промышленных применениях важно производить полимеразы, обладающие различными полезными свойствами. Это увеличивает точность метода и делает его более быстрым. Полимераза Phusion и Taq - это два коммерчески производимых фермента термостабильной полимеразы, которые используются в специальных молекулярных приложениях. Phusion - это ДНК-полимераза, выделенная из Pyrococcus furiosus, которая в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности. ДНК-полимераза Taq - это стандартная ДНК-полимераза, используемая в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и ее выделяют из термостабильных бактерий; Thermus aquaticus. Ключевое различие между двумя ферментами - это исходный микроорганизм. Phusion изолирован от экстремофила Pyrococcus furiosus, тогда как Taq-полимераза изолирована от термофила Thermus aquaticus. Полимераза Taq выделяется из термофила Thermus aquaticus. Полимераза Taq выделяется из термофила Thermus aquaticus.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Обзор и ключевые различия

2. Что такое Phusion

3. Что такое Taq-полимераза

4. Сходства между Phusion и Taq-полимеразой

5. Сравнение бок о бок - Phusion и Taq-полимераза в табличной форме

6. Резюме

Что такое Phusion?

ДНК-полимераза Phusion - это новая полимераза, которую получают путем выделения фермента из Pyrococcus furiosus, который является экстремофильной архей. Эти микробы обитают в условиях чрезвычайно высоких температур, что делает полимеразу очень термостойкой полимеразой. Фьюжн-полимераза используется для получения максимальной точности по сравнению с обычной термостабильной полимеразой; Полимераза Taq. Фьюжн-полимераза способна амплифицировать длинные матрицы геномной ДНК размером до 7,5 килобайт. Емкость полимеризации оптимальная из Phusion полимеразы при 72 ⁰ C. Phusion также используется в клонировании продуктов для секвенирования, анализа экспрессии и анализа мутаций.

ДНК-полимераза Phusion обладает 3'-5'-экзонуклеазной активностью. Это позволяет вычитывать вновь синтезированную цепь после синтеза. Следовательно, нуклеотидные несоответствия легко восстанавливаются. Таким образом, он имеет меньшую частоту ошибок. Общие преимущества полимеразы Phusion:

Исключительная верность
Высокая скорость и сокращенное время продления
Надежные реакции и минимальная оптимизация
Высокая доходность

Рисунок 01: Phusion

Основным недостатком полимеразы Phusion является то, что она ингибируется в присутствии дезоксиуридинтрифосфата (dUTP). Когда dUTPs накапливаются в реакционной смеси, это может ингибировать действие полимеразы Phusion. Это предотвращается обработкой реакционной смеси dUTPase перед добавлением фермента. В настоящее время устойчивый к dUTP вариант полимеразы Phusion, известный как Pfu Turbo, используется вместо полимеразы Phusion в качестве средства решения этой проблемы.

Что такое Taq-полимераза?

Изобретение ДНК-полимеразы Taq произвело революцию в области молекулярной биологии. Это решило главную проблему амплификации ДНК. ДНК-полимераза Taq представляет собой термостойкий полимеразный фермент, выделенный из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Открытие этого фермента привело к развитию ПЦР. Этот фермент позволил использовать полимеразную цепную реакцию при амплификации ДНК вместо обычных трудоемких методов клонирования. В настоящее время ПЦР используется в молекулярной диагностике, сельском хозяйстве и промышленности, и в этот метод добавлено множество новых вариаций.

Ключевое различие между Phusion и Taq-полимеразой

Рисунок 02: Taq-полимераза

Taq - ДНК - полимераза функции в диапазоне температур от 72 до оптимальных ⁰ С - 80 ⁰ С. Taq - ДНК - полимеразы необходима кофактором; магний за его функцию. Полимераза Taq не обладает способностью корректуры 3 '- 5', поэтому частота ошибок ДНК-полимеразы Taq высока по сравнению с более новыми типами ДНК-полимераз, такими как полимераза Phusion и т. Д. Но популярность ДНК-полимеразы Taq остается неизменной. то же самое во всем мире науки благодаря удобству и гибкости фермента.

В чем сходство между полимеразой Phusion и Taq?

Оба фермента полимеразы Phusion и Taq являются ферментами полимеризации, которые способны добавлять нуклеотиды к 3'-свободному концу цепи ДНК.
И Phusion, и Taq полимеразы требуют последовательности праймера для инициации полимеризации.
Полимеразы Phusion и Taq термостабильны.
Полимеразы Phusion и Taq используются в механизмах ПЦР для амплификации ДНК.
При добавлении полимеразы в реакционную смесь полимеразы Phusion и Taq добавляются в последнюю очередь для обеспечения эффективности фермента.
Полимеразы Phusion и Taq коммерчески синтезируются для экспериментальных целей молекулярной биологии.
И Phusion, и Taq полимеразы требуют кофактора для выполнения своей функции.

В чем разница между Phusion и Taq-полимеразой?

Различать статью в середине перед таблицей

Phusion vs Taq-полимераза
Phusion - это ДНК-полимераза, выделенная из Pyrococcus furiosus, которая в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности.	ДНК-полимераза Taq - это стандартная ДНК-полимераза, используемая в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и ее выделяют из термостабильной бактерии Thermus aquaticus.
Источник Организм
Фузия добывается из экстремофильных архей - Pyrococcus furiosus.	Эти литературные произведения охватывают период от периода колонизации до периода деколонизации.
Возможность корректуры
В Phusion присутствует способность корректировать 3-5 футов.	У полимеразы Taq отсутствует способность к корректирующему считыванию 3 '- 5'.
Верность
Phusion обеспечивает высокую точность воспроизведения.	Полимераза Taq демонстрирует низкую точность воспроизведения.
Усиление
Phusion способен усиливать длинные фрагменты ДНК.	Полимераза Taq способна амплифицировать гораздо более короткие фрагменты ДНК.
dUTP отравление
Действие фузии тормозится из-за нечетного накопления.	Полимераза Taq не ингибируется dUPT.

Заключение - Phusion vs Taq-полимераза

ДНК-полимераза Phusion и Taq - две термостойкие полимеразы, которые используются в методах ПЦР. Phusion - это полимераза, выделенная из экстремофила Pyrococcus furiosus, тогда как Taq выделена из термостабильных бактерий Thermus aquaticus. Открытие ДНК-полимеразы Taq привело к изобретению ПЦР. Phusion имеет много преимуществ перед Taq, что сделало Phusion лучшим вариантом для получения ДНК с высокой точностью. Однако полимераза Taq все еще используется в качестве стандартного фермента полимеразы в ПЦР. В этом разница между полимеразой Phusion и Taq.