Ключевое различие - Phusion vs Taq-полимераза
ДНК-полимеразы - широко используемые ферменты в методах молекулярной биологии, а также естественным образом присутствуют во всех организмах, подвергающихся репликации ДНК. Они являются ключевыми ферментами полимеризации, которые участвуют во время репликации. ДНК-полимераза способна добавлять нуклеотиды к свободному 3'-концу цепи ДНК, тем самым вызывая удлинение новой цепи. В настоящее время в связи с развитием молекулярной биологии в диагностике заболеваний и промышленных применениях важно производить полимеразы, обладающие различными полезными свойствами. Это увеличивает точность метода и делает его более быстрым. Полимераза Phusion и Taq - это два коммерчески производимых фермента термостабильной полимеразы, которые используются в специальных молекулярных приложениях. Phusion - это ДНК-полимераза, выделенная из Pyrococcus furiosus, которая в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности. ДНК-полимераза Taq - это стандартная ДНК-полимераза, используемая в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и ее выделяют из термостабильных бактерий; Thermus aquaticus. Ключевое различие между двумя ферментами - это исходный микроорганизм. Phusion изолирован от экстремофила Pyrococcus furiosus, тогда как Taq-полимераза изолирована от термофила Thermus aquaticus. Полимераза Taq выделяется из термофила Thermus aquaticus. Полимераза Taq выделяется из термофила Thermus aquaticus.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и ключевые различия
2. Что такое Phusion
3. Что такое Taq-полимераза
4. Сходства между Phusion и Taq-полимеразой
5. Сравнение бок о бок - Phusion и Taq-полимераза в табличной форме
6. Резюме
Что такое Phusion?
ДНК-полимераза Phusion - это новая полимераза, которую получают путем выделения фермента из Pyrococcus furiosus, который является экстремофильной архей. Эти микробы обитают в условиях чрезвычайно высоких температур, что делает полимеразу очень термостойкой полимеразой. Фьюжн-полимераза используется для получения максимальной точности по сравнению с обычной термостабильной полимеразой; Полимераза Taq. Фьюжн-полимераза способна амплифицировать длинные матрицы геномной ДНК размером до 7,5 килобайт. Емкость полимеризации оптимальная из Phusion полимеразы при 72 0 C. Phusion также используется в клонировании продуктов для секвенирования, анализа экспрессии и анализа мутаций.
ДНК-полимераза Phusion обладает 3'-5'-экзонуклеазной активностью. Это позволяет вычитывать вновь синтезированную цепь после синтеза. Следовательно, нуклеотидные несоответствия легко восстанавливаются. Таким образом, он имеет меньшую частоту ошибок. Общие преимущества полимеразы Phusion:
- Исключительная верность
- Высокая скорость и сокращенное время продления
- Надежные реакции и минимальная оптимизация
- Высокая доходность
Рисунок 01: Phusion
Основным недостатком полимеразы Phusion является то, что она ингибируется в присутствии дезоксиуридинтрифосфата (dUTP). Когда dUTPs накапливаются в реакционной смеси, это может ингибировать действие полимеразы Phusion. Это предотвращается обработкой реакционной смеси dUTPase перед добавлением фермента. В настоящее время устойчивый к dUTP вариант полимеразы Phusion, известный как Pfu Turbo, используется вместо полимеразы Phusion в качестве средства решения этой проблемы.
Что такое Taq-полимераза?
Изобретение ДНК-полимеразы Taq произвело революцию в области молекулярной биологии. Это решило главную проблему амплификации ДНК. ДНК-полимераза Taq представляет собой термостойкий полимеразный фермент, выделенный из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Открытие этого фермента привело к развитию ПЦР. Этот фермент позволил использовать полимеразную цепную реакцию при амплификации ДНК вместо обычных трудоемких методов клонирования. В настоящее время ПЦР используется в молекулярной диагностике, сельском хозяйстве и промышленности, и в этот метод добавлено множество новых вариаций.
Рисунок 02: Taq-полимераза
Taq - ДНК - полимераза функции в диапазоне температур от 72 до оптимальных 0 С - 80 0 С. Taq - ДНК - полимеразы необходима кофактором; магний за его функцию. Полимераза Taq не обладает способностью корректуры 3 '- 5', поэтому частота ошибок ДНК-полимеразы Taq высока по сравнению с более новыми типами ДНК-полимераз, такими как полимераза Phusion и т. Д. Но популярность ДНК-полимеразы Taq остается неизменной. то же самое во всем мире науки благодаря удобству и гибкости фермента.
В чем сходство между полимеразой Phusion и Taq?
- Оба фермента полимеразы Phusion и Taq являются ферментами полимеризации, которые способны добавлять нуклеотиды к 3'-свободному концу цепи ДНК.
- И Phusion, и Taq полимеразы требуют последовательности праймера для инициации полимеризации.
- Полимеразы Phusion и Taq термостабильны.
- Полимеразы Phusion и Taq используются в механизмах ПЦР для амплификации ДНК.
- При добавлении полимеразы в реакционную смесь полимеразы Phusion и Taq добавляются в последнюю очередь для обеспечения эффективности фермента.
- Полимеразы Phusion и Taq коммерчески синтезируются для экспериментальных целей молекулярной биологии.
- И Phusion, и Taq полимеразы требуют кофактора для выполнения своей функции.
В чем разница между Phusion и Taq-полимеразой?
Различать статью в середине перед таблицей
Phusion vs Taq-полимераза |
|
| Phusion - это ДНК-полимераза, выделенная из Pyrococcus furiosus, которая в основном используется в экспериментах по клонированию для повышения точности. | ДНК-полимераза Taq - это стандартная ДНК-полимераза, используемая в полимеразной цепной реакции (ПЦР), и ее выделяют из термостабильной бактерии Thermus aquaticus. |
| Источник Организм | |
| Фузия добывается из экстремофильных архей - Pyrococcus furiosus. | Эти литературные произведения охватывают период от периода колонизации до периода деколонизации. |
| Возможность корректуры | |
| В Phusion присутствует способность корректировать 3-5 футов. | У полимеразы Taq отсутствует способность к корректирующему считыванию 3 '- 5'. |
| Верность | |
| Phusion обеспечивает высокую точность воспроизведения. | Полимераза Taq демонстрирует низкую точность воспроизведения. |
| Усиление | |
| Phusion способен усиливать длинные фрагменты ДНК. | Полимераза Taq способна амплифицировать гораздо более короткие фрагменты ДНК. |
| dUTP отравление | |
| Действие фузии тормозится из-за нечетного накопления. | Полимераза Taq не ингибируется dUPT. |
Заключение - Phusion vs Taq-полимераза
ДНК-полимераза Phusion и Taq - две термостойкие полимеразы, которые используются в методах ПЦР. Phusion - это полимераза, выделенная из экстремофила Pyrococcus furiosus, тогда как Taq выделена из термостабильных бактерий Thermus aquaticus. Открытие ДНК-полимеразы Taq привело к изобретению ПЦР. Phusion имеет много преимуществ перед Taq, что сделало Phusion лучшим вариантом для получения ДНК с высокой точностью. Однако полимераза Taq все еще используется в качестве стандартного фермента полимеразы в ПЦР. В этом разница между полимеразой Phusion и Taq.
