Ключевое различие - окрашивание по Граму и кислотостойкость
Бактерии - очень мелкие микроорганизмы. Они прозрачны, и их трудно обнаружить в живых и неокрашенных условиях. Таким образом, разработаны различные методы окрашивания для облегчения обнаружения бактерий. Существует три основных метода окрашивания: простое окрашивание, дифференциальное окрашивание и структурное окрашивание. Дифференциальное окрашивание - это метод, при котором для дифференциации бактерий используется более одного окрашивания. Окрашивание по Граму и кислотостойкое окрашивание наиболее известны как дифференциальные пятна. Окрашивание по Граму - это метод дифференциального окрашивания, который разделяет бактерии на две группы, известные как грамположительные бактерии и грамотрицательные бактерии. Кислотостойкое окрашивание - это дифференциальное окрашивание, используемое для идентификации кислотоустойчивых организмов, таких как Mycobacterium, от некислотноустойчивых организмов. Это ключевое различие между окрашиванием по Граму и кислотно-стойким окрашиванием.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое краситель по Граму
3. Что такое кислотоупорный
4. Сходства между окрашиванием по Граму и кислотным голоданием
5. Параллельное сравнение - окрашивание по Граму и кислотное голодание в табличной форме
6. Резюме
Что такое пятно по Граму?
Окрашивание по Граму - важный метод дифференциального окрашивания, используемый для идентификации бактерий в микробиологии. Этот метод был введен датским бактериологом Гансом Кристианом Грамом в 1884 году. Окрашивание по Граму делит бактерии на две основные группы, названные грамположительными и грамотрицательными, которые очень важны для классификации и идентификации бактерий. Микробиологи проводят окрашивание по Граму в качестве первого шага в определении характеристик бактерий во время своих исследований.
Бактерии сгруппированы на основе различий в их клеточной стенке. Грамположительные бактерии состоят из толстого пептидогликанового слоя в их клеточной стенке, а грамотрицательные бактерии состоят из тонкого пептидогликанового слоя в их клеточной стенке. Результат окрашивания по Граму будет основываться на разнице в толщине пептидогликанового слоя клеточной стенки.
Окрашивание по Граммам проводится с использованием четырех различных реагентов: первичная морилка, протрава, обесцвечивающее средство и контрпятно. Кристаллический фиолетовый и сафранин используются в качестве основных и противодействующих красителей, соответственно, в то время как граммы йода и 95% спирта используются в качестве протравы и обесцвечивающего средства соответственно. Основные этапы окрашивания граммов следующие:
- Бактериальный мазок готовят на чистом предметном стекле, фиксируют нагреванием и охлаждают.
- Мазок заливают кристально-фиолетовым на 1-2 минуты.
- Мазок промывают проточной водой из-под крана, чтобы удалить лишние пятна.
- Грамм йода наносится на мазок на 1 минуту.
- Мазок промывают проточной водой из-под крана.
- Мазок промывают 95% спиртом в течение 2-5 секунд и ополаскивают проточной водой из-под крана.
- Мазок контркрашивают сафранином в течение 1 минуты.
- Мазок промывают проточной водой из-под крана, сушат и исследуют под микроскопом.
В конце окрашивания по грамму грамотрицательные бактерии будут отмечены розовым цветом, а грамположительные бактерии будут отмечены фиолетовым цветом.
Рисунок 01: Грамотрицательные и грамположительные бактерии
Результат окрашивания по грамму определяется толщиной пептидогликанового слоя в их клеточной стенке. На этапе обесцвечивания первичное пятно и протрава легко удаляются с грамотрицательных бактерий и становятся бесцветными, так как они имеют тонкий слой пептидогликана. Первичная окраска сохраняется у грамположительных бактерий, поскольку они имеют толстый пептидогликановый слой. Контркрашивание не будет эффективным для грамположительных бактерий из-за удержания основного пятна. Таким образом, грамположительные бактерии будут видны в основном окраске, то есть в пурпурном цвете. Контркрашивание окрасит грамотрицательные бактерии, и они будут видны выбранным цветом, то есть цветом сафранина. Следовательно, легко разделить бактерии на две группы по окраске по Граму, и это полезно для дифференциации и идентификации бактерий.
Что такое кислотный голод?
Кислотостойкость - это физическое свойство некоторых бактерий, в частности их устойчивость к обесцвечиванию кислотами во время процедур окрашивания. После окрашивания эти организмы сопротивляются процедурам обесцвечивания на основе разбавленной кислоты и / или этанола, которые обычно используются во многих протоколах окрашивания. Таким образом, эти организмы получили название «кислые». Это свойство проявляется благодаря высокому уровню воскообразного материала (миколовой кислоты) в их клеточных стенках. Этот тест имеет решающее значение для выявления Mycobacterium tuberculosis.
Рисунок 2: Кислотоустойчивые микобактерии
Этот кислотостойкий краситель был разработан Полом Эрлихом в 1882 году. Методика кислотостойкости Эрлиха была модифицирована Цилем-Нильсеном, и теперь он используется все чаще. Процедура кислотно-быстрого окрашивания включает три разных реагента. Карбол фушин используется в качестве основного красителя. Кислый спирт используется в качестве обесцвечивающего агента. Метиленовый синий используется в качестве противокрасочного средства. Процедура окрашивания выполняется следующим образом.
- Первичная окраска (карбол фуксин) наносится на фиксированный образец на предметном стекле (все клетки будут окрашены в красный цвет).
- Предметное стекло нагревают путем пропаривания в течение 5 минут, что способствует правильному проникновению пятен в клетки.
- Затем добавляется обесцвечивающий раствор (он удаляет красный краситель со всех клеток, кроме кислотоустойчивых бактерий).
- Метиленовый синий добавлен в качестве противокрасителя (он окрашивает все обесцвеченные бактериальные клетки).
- Кислотоустойчивые бактерии остаются красными, а некислотные бактерии окрашиваются в синий цвет.
Каковы сходства между окрашиванием по Граму и кислотным голоданием?
- Окрашивание по Граму и Кислотное окрашивание - это два разных метода окрашивания.
- Оба метода делят бактерии на две группы.
- Обе техники используют два морилки и одно обесцвечивание.
В чем разница между красителем по Граму и кислотным голоданием?
Различать статью в середине перед таблицей
Окрашивание по Граму против кислотостойкости |
|
| Окрашивание по Граму - это метод дифференциального окрашивания, при котором бактерии разделяются на две группы: грамположительные бактерии и грамотрицательные бактерии. | Кислотостойкое окрашивание - это дифференциальное окрашивание, используемое для идентификации кислотоустойчивых организмов от некислотных организмов. |
| Первичное пятно | |
| Кристаллический фиолетовый - это обычно используемый первичный краситель при окрашивании по Граму. | Карболфуксин является основным красителем, используемым при кислотном голодании. |
| Обесцвечивающий агент | |
| 95% спирт используется в качестве обесцвечивающего средства при пятнах по Граму. | Кислый спирт используется в качестве обесцвечивающего агента в кислотостойких продуктах. |
| Счетчик пятен | |
| Окрашивание по Граму использует сафранин в качестве контр-красителя. | В качестве противодействующего красителя для кислотостойких красителей используется метиленовый синий. |
| Наблюдение | |
| Грамотрицательные бактерии наблюдаются в пурпурном цвете, а грамположительные бактерии - в пурпурном. | Кислотостойкие бактерии отображаются красным цветом, а некислотные бактерии - синим цветом. |
Резюме - Окрашивание в граммах против кислотостойкости
Визуализация микроорганизмов в живом состоянии затруднена. Поэтому для изучения их свойств широко используются биологические пятна и процедуры окрашивания. Дифференциальное окрашивание - это один из методов окрашивания, используемый для дифференциации бактерий. Окрашивание по Граму и кислотостойкое окрашивание - это два разных метода окрашивания. Окрашивание по Граму позволяет дифференцировать грамотрицательные бактерии и грамположительные бактерии в зависимости от толщины их клеточных стенок. Кислотоустойчивое окрашивание отличает кислотоустойчивые бактерии от некислотных бактерий на основе содержания миколиновой кислоты в клеточной стенке. В этом разница между кислотостойкостью и окраской по Граму.
Скачать PDF-версию теста Gram Stain vs Acid Fast
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономных целях в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, скачайте PDF-версию здесь. Разница между красителем по Граму и кислотной стойкостью.
