Ключевое различие - гель для укладки и разделительный гель
Термины «укладывающийся гель» и «разделяющий гель» используются для объяснения метода SDS-PAGE. SDS-PAGE или электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия - это лабораторный метод, который используется для разделения белковых молекул на основе их молекулярных масс. Теория, лежащая в основе этого метода, заключается в том, что белки с разной молекулярной массой показывают разные скорости миграции; молекулы с низким молекулярным весом перемещаются быстрее, тогда как молекулы с высоким молекулярным весом перемещаются медленно. Среда для миграции - гель. Существует два типа гелей, называемых гелем для укладки и разделительным гелем. Ключевое различие между накопительным гелем и разделяющим гелем состоит в том, что pH накопительного геля составляет 6,8, тогда как pH разделяющего геля составляет 8,8.
СОДЕРЖАНИЕ
1. Обзор и основные различия
2. Что такое штабелирующий гель
3. Что такое разделяющий гель
4. Взаимосвязь между штабелированием геля и разделяющим гелем
5. Сравнение бок о бок - сложение геля и разделительный гель в табличной форме
6. Резюме
Что такое укладочный гель?
Укладывающий гель - это низкоконцентрированный полиакриламидный гель, который помещают поверх более концентрированного разделяющего геля (разделяющего геля) методом SDS-PAGE. Укладывающий гель используется для улучшения разрешения электрофореза. Разрешение увеличивается из-за разницы между концентрациями укладывающего геля и разделяющего геля, которые влияют на белки в образце. Поскольку концентрация полиакриламида в геле для укладки мала, размер пор больше. Это также помогает увеличить разделение.
Укладывающий гель представляет собой рыхлый полиакриламидный гель с большими порами, состоящий примерно из 7% полиакриламида. Эти поры не действуют как значительный барьер для крупных белковых молекул. Следовательно, этот гель незначительно влияет на подвижность этих белков. Это делает разделение в зависимости от подвижности и размера белков, концентрируя их между двумя гелями.
Рисунок 01: Акриламидный гель в SDS-PAGE
PH геля для укладки составляет 6,8. Его pH более кислый, чем у геля, растворяющегося на 2 единицы pH. Этот pH означает более низкую ионную силу, следовательно, более высокое электрическое сопротивление. Это провоцирует подвижность белков по сравнению с другими заряженными частицами, присутствующими в геле.
Что такое разделяющий гель?
Разделительный гель или разделительный гель в методике SDS-PAGE представляет собой высококонцентрированный полиакриламидный гель, который помещают поверх низкоконцентрированного стекирующего геля. Разделительный гель содержит большое количество полиакриламида (10%). PH этого геля поддерживается равным pH = 8,8, что является более высоким уровнем pH, чем уровень pH стекирующего геля.
Рисунок 02: Аппарат для гель-электрофореза
Когда белковые молекулы достигают разделяющего геля, миграция этих молекул замедляется, поскольку разделяющий гель представляет собой гель с высокой концентрацией и небольшим размером пор, который может действовать как значительный барьер для движения белковых молекул. Это замедление позволяет другим белкам медленно мигрировать, чтобы наверстать упущенное, в результате чего между двумя гелями образуется узкая концентрированная полоса.
Какая связь между укладывающимся гелем и разделяющим гелем?
Оба типа геля для укладки и разделения используются в одном аппарате
В чем разница между укладывающимся гелем и разделяющим гелем?
Различать статью в середине перед таблицей
Укладочный гель против разделяющего геля |
|
| Укладывающий гель - это низкоконцентрированный полиакриламидный гель, который помещают поверх более концентрированного разделяющего геля (разделяющего геля) методом SDS-PAGE. | Разделительный гель или разделительный гель в методике SDS-PAGE представляет собой высококонцентрированный полиакриламидный гель, который помещают поверх низкоконцентрированного стекирующего геля. |
| Размещение | |
| Укладывающий гель наносят на рассасывающийся (разделяющий) гель. | Разделительный гель помещается на дно емкости, используемой для гель-электрофореза. |
| Концентрация | |
| Концентрация укладывающего геля высокая. | Концентрация разделяющего геля низкая. |
| Содержание полиакриламида | |
| Укладочный гель содержит около 7% полиакриламида. | Разделительный гель содержит около 10% полиакриламида. |
| pH | |
| PH геля для укладки составляет 6,8. | PH разделяющего геля составляет 8,8. |
| Размер пор | |
| В укладочном геле присутствуют поры большого размера. | В разделяющем геле присутствуют поры небольшого размера. |
| разрешение | |
| Укладка геля дает лучшее разрешение. | Разделительный гель дает плохое разрешение. |
Резюме: гель для укладки или разделительный гель
Укладывающий гель и разделяющий гель - это два типа полиакриламидных гелей, используемых для лучшего разделения молекул белка в данном образце. Разница между стекирующим гелем и разделяющим гелем заключается в том, что pH стекирующего геля составляет 6,8, тогда как pH разделяющего геля составляет 8,8.
